【摘 要】
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目的 探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对肺泡Ⅱ型上皮细胞热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma glutamyl cysteine
【机 构】
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南华大学研究生院,湖南省老年医院湖南省老年医学研究所呼吸疾病研究室
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目的 探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对肺泡Ⅱ型上皮细胞热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma glutamyl cysteine syntase,γ-GCS)表达的影响.方法 体外培养肺泡Ⅱ细胞(A549),加入5％浓度的CSE作用于细胞0、6、12、24、48h以及不同浓度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用细胞24 h,运用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测γ-GCS mRNA含量的变化;不同浓度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用细胞12、24 h以及5％的CSE作用细胞0、6、12、24、48 h,采用免疫蛋白印迹(western bloting,WB)检测γ-GCS、HSP27及其磷酸化HSP27(p-HSP27)在蛋白表达水平的变化.结果 ①5％CSE的作用下,随着干预时间的延长,γ-GCS mRNA含量呈明显增加趋势(P＜0.05);②不同浓度的CSE作用细胞24 h,随着浓度的增加,γ-GCS mRNA含量呈明显增加趋势(P＜0.05);③不同浓度的CSE(0％,2.5％,5％,10％)作用细胞12、24 h以及5％的CSE作用细胞0、6、12、24、48 h,HSP27及p-HSP27的蛋白水平有明显上调趋势(P＜0.05),γ-GCS蛋白含量也呈浓度和时间依赖上升.结论 CSE能够引起肺泡上皮细胞应激反应,通过上调HSP27磷酸化及表达γ-GCS对肺泡上皮细胞具有保护作用机制.CSE可通过上调HSP27的磷酸化及γ-GCS的表达启动肺泡上皮细胞的应激反应,以保护细胞.
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