【摘 要】
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目的:探究miRNA-325-3p及其靶基因细胞角蛋白13 (cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌细胞CNEl的放疗敏感性的影响.方法:通过miRBase、Targetscan及Microcosm三大数据库预测miRNA-3
【机 构】
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昆明医科大学第四附属医院耳鼻咽喉头颈外科,云南昆明,650021
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目的:探究miRNA-325-3p及其靶基因细胞角蛋白13 (cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌细胞CNEl的放疗敏感性的影响.方法:通过miRBase、Targetscan及Microcosm三大数据库预测miRNA-325-3p的潜在靶基因,并通过双荧光素酶活性检测实验进行验证,qPCR检测不同放射剂量下鼻咽癌细胞CNE1中miRNA-325-3p及其靶基因的表达水平变化,通过克隆形成实验观察不同放射剂量下过表达miRNA-325-3p及敲低靶基因后CNE1细胞克隆形成率的变化,流式细胞术验证过表达miRNA-325-3p及敲低靶基因后CNE1在不同放射剂量下凋亡水平的变化,MTT法检测miRNA-325-3p过表达和CK13敲低组鼻咽癌细胞CNE1在不同放射剂量下的细胞存活率以验证其放疗敏感性的变化.结果:CK13确认为miRNA-325-3p的潜在靶基因,鼻咽癌细胞CNE1经放射处理后,miRNA-325-3p的表达水平显著升高、CK13的表达水平显著降低(均P＜0.05).miRNA-325-3p表达量上调和CK13基因沉默均显著提高CNE1细胞的存活率[miRNA上调时:(60.14±3.55)％vs(19.23±3.42)％,t=14.37、P＜0.01;CK13沉默时:(76.15±5.13)％vs (28.53±3.68)％,t=13.06、P＜0.01]和克隆形成率,降低了凋亡率[miRNA上调时:(27.95±2.67)％ vs(51.68±3.47)％,t=9.39、P＜0.01;CK13沉默时:(20.31±2.62)％vs(38.14±3.83)％,t=6.66、P＜0.01].结论:miRNA-325-3p能够通过下调靶基因CK13的表达降低鼻咽癌细胞CNE1对放疗的敏感性.
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