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青霉素与青霉素V两者抗菌谱窄。虽然对革兰阳性菌、阴性球菌、嗜血杆菌属等少数阴性杆菌及螺旋体有良好作用,但主要用于不产β-内酰胺酶的革兰阳性菌,包括葡萄球菌、链球菌属、芽孢杆菌等所致感染。根据血药浓度的高低，不同制剂的适应调咯有不同。青霉素钠或钾盐的血药浓度最高，用于较重的感染，如肺炎、心内膜炎、白喉、破伤风、钩端螺旋体病等。