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摘 要：盐酸氨溴索片是一种常见的非处方类药品，对于患者痰液粘稠不易可咳出的现象有一定的改善作用。高效液相色谱法常用于检验混合溶剂的含量分析，在化学、医学等各项检验中都有广泛的应用。本文将对应用高效液相色谱法进行的盐酸氨溴索片的含量的测定实验进行将要的概括和分析。希望能为广大医学工作者的临床实验和工作提供有一定价值的参考。
关键词：高效液相色谱法；盐酸氨溴索片；含量；测定
盐酸氨溴索，化学名称为反式4-[（2-氨基-3，5二溴-苯基）甲基-氨基]环己醇盐酸盐，通常情况下呈白色，是一种粘液调节剂，针对咳痰症状有一定的改善作用，在医疗领域常被用于治疗支气管炎和哮喘等呼吸道疾病。医学实验中，可以采用紫外分光光度法对盐酸氨溴索片的含量进行测定。但这种方法存在这某些不确定因素，会影响正常实验的结果，产生误差。而选用高效液相色谱法测定盐酸氨溴索片含量的方式准确性较强，值得推广。本文将对该实验进行简要介绍。
1 实验器材与实验样品
1.1 实验器材
高效液相色谱法也叫做高压液相色谱法，是色谱法的以一种主要构成形式。使用高效液相色谱法，所需的器材主要有高压输液泵、色谱柱、进样器、检测器等。对该技术的准确应用，可以在较短时间内通过对相对较少的样品的实验分析得出准确的实验结果。这种方法优于传统的紫外分光光度法，能够灵敏而精确地对样品进行准确的分析，从而达到实验目的。
1.2 盐酸氨溴索片
盐酸氨溴索片的主要成分是盐酸氨溴索，辅料包括淀粉、乳糖、硬脂酸镁和胶态二氧化硅。盐酸氨溴索片外观为白色的片剂，在阴凉、密闭的环境中可以保存60个月。它的服用方法也比较简单，成人每日在三餐后服用，每次服用一到两片就可以了。
1.3 实验样品
实验应该选用药品和试剂主要有盐酸氨溴索片、甲醇、醋酸铵溶液，以及分析纯。为准确完成实验，应准备充足的样品，用以设置对照组实验。
2 实验流程
为使实验结果准确可靠，实验应严格遵循规定的实验流程。在实验进行工程中，要严格按照实验室的相关规定进行操作。
2.1 色谱
色谱的选择应该严格满足实验所需要求。实验应该选用Phenomenex C18色谱柱。
实验应该选择甲醇和0.1mol/L的醋酸铵缓冲液按照65比35的比例制作形成流动相。其中，需要向800ml的水中，加入7.7g的醋酸铵，使之溶解后，再将溶液的PH值调至3.3，之后，加入适量的水，将溶液稀释到1000ml。
实验应该选择波长244nm，波速1.0ml/min的检测波，同时实验的进样量应为10μl。
另外，实验只需在室温条件下进行即可。
2.2 实验溶液的配制
实验所用溶液也按照相关操作、配比后，使之成为实验组和对照组两份溶液样品。
2.2.1 实验组溶液。进行试验之前，应选取20片盐酸氨溴索片，准确称量其重量后，将其研磨成分，再称取10mg的盐酸氨溴索细粉。再把细粉放置在容量瓶中，加流动相至100ml，摇晃使其均匀溶解后，取其滤液作为实验组试液。
2.2.2 对照组溶液。把之前研磨成粉的盐酸氨溴索再取10mg，同样放置在容量瓶中，加入流动相至100ml后，摇晃均匀，不做其他处理。将这部分溶液作为对照组溶液。
2.3 试用性实验
实验过程中，应该按照已经规定好的色谱条件，取实验组溶液和对照组溶液各10μl。把两组溶液均记录在色谱图中。下图1-A为对照组溶液所记录的色谱图，图1-B表明实验中盐酸氨溴索的保留持续时间大概是11分，与其他组分峰的分离度超过了1.5。实验中的理论板书为3300。
2.4 辅料干扰试验
按处方中各辅料的比例配制成不含盐酸氨溴索的空白样品，照“2.2.1”项下方法配制溶液，按给定的色谱条件，取10μl进样，记录色谱图，见图1-C。辅料对盐酸氨溴索峰无干扰。
2.5 线性关系
分别取盐酸氨溴索对照品适量，照“2.2.2”项下方法操作，配制10、20、50、100和150μg/ml对照品溶液，按给定的色谱条件进行测定，记录各浓度的色谱峰面积，以峰面积对溶液浓度求得回归方程为Y=1.15×10^4X+28573，r=0.9992，在10～150μg/ml范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取浓度为100μg/ml的对照品溶液连续进样6次，RSD=0.44%，表明所选定的色谱条件系统稳定。
2.7 实验的重现性
按照之前选择的药品，取同一批次的药品进行前后共5此的测量实验。实验表明，样品盐酸氨溴索片的平均含量大约是药品标识含量的99.2%，RSD=0.18%。实验测得的数据说明，这种实验发放的重现性比较好。
2.8 回收率试验
取處方量的辅料适量，精密称取盐酸氨溴索对照品8、10和12mg各3份，照“2.2.1”项下方法配制溶液，按给定的色谱条件，取10μl进样，记录色谱图，测得平均回收率为99.0%，RSD=0.77%（n=9）。
2.9 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液，按给定的色谱条件在0、2、4、6和8h分别进样测定峰面积，RSD=0.82%，表明样品溶液在8h内稳定。
2.10 样品含量测定
取盐酸氨溴索片3批各20片，称重，研细，照“2.2.1”项下方法操作，按给定的色谱条件，取10μl进样，各批分别进样3次，记录色谱图。另精密称取盐酸氨溴索对照品10mg，置100ml量瓶中，照“2.2.1”项下方法配制溶液，按给定的色谱条件，取10μl进样，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，3批样品含量测定结果，见表3。
3 实验结论
实验结束之后，如果测量得出实验所用流动相中，甲醇的比例较实验进行前减少，说明实验中样品的保留时间较长，消耗也相应增多。如果流动相中，甲醇比例较实验前增加，则说明样品的分离度比较小，所以是实验选用流动相的最佳比例为65个单位的甲醇比35个单位的醋酸铵缓冲液。
结束语
盐酸氨溴索片是临床医学中用于治疗咳痰病症的重要药品，在临床医学中对相关疾病的治疗具有非常显著的改善作用。采用高效液相色谱法对盐酸氨溴索片的含量进行测量，测量实验方法较为简单、快捷，能够为实际制药工作和医学研究工作提供有用的参考。因此，高效液相色谱法测定盐酸氨溴索片含量的方法可被广泛应用。
参考文献
[1]郑芳，朱雪松，师娉嫔，等.盐酸氨溴索注射液与注射用加替沙星的配伍稳定性考察[J].中国药师，2010，13（9）：1367-1368.
[2]国家食品药品监督管理局标准（试行）[S].YBH21062005.
[3]国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京：中国医药科技出版社，2010：225-226，765-768.
[4]王博，李洪起，徐芳，等.HPLC法测定盐酸氨溴索注射液中有关物质[J].现代药物与临床，2012，27（3）：226-228.
[5]宋晓楠，王晓波，袭荣刚，等.高效液相色谱法测定人血浆中盐酸氨溴索的浓度[J].药学实践杂志，2012，30（1）：29-30.
关键词：高效液相色谱法；盐酸氨溴索片；含量；测定
盐酸氨溴索，化学名称为反式4-[（2-氨基-3，5二溴-苯基）甲基-氨基]环己醇盐酸盐，通常情况下呈白色，是一种粘液调节剂，针对咳痰症状有一定的改善作用，在医疗领域常被用于治疗支气管炎和哮喘等呼吸道疾病。医学实验中，可以采用紫外分光光度法对盐酸氨溴索片的含量进行测定。但这种方法存在这某些不确定因素，会影响正常实验的结果，产生误差。而选用高效液相色谱法测定盐酸氨溴索片含量的方式准确性较强，值得推广。本文将对该实验进行简要介绍。
1 实验器材与实验样品
1.1 实验器材
高效液相色谱法也叫做高压液相色谱法，是色谱法的以一种主要构成形式。使用高效液相色谱法，所需的器材主要有高压输液泵、色谱柱、进样器、检测器等。对该技术的准确应用，可以在较短时间内通过对相对较少的样品的实验分析得出准确的实验结果。这种方法优于传统的紫外分光光度法，能够灵敏而精确地对样品进行准确的分析，从而达到实验目的。
1.2 盐酸氨溴索片
盐酸氨溴索片的主要成分是盐酸氨溴索，辅料包括淀粉、乳糖、硬脂酸镁和胶态二氧化硅。盐酸氨溴索片外观为白色的片剂，在阴凉、密闭的环境中可以保存60个月。它的服用方法也比较简单，成人每日在三餐后服用，每次服用一到两片就可以了。
1.3 实验样品
实验应该选用药品和试剂主要有盐酸氨溴索片、甲醇、醋酸铵溶液，以及分析纯。为准确完成实验，应准备充足的样品，用以设置对照组实验。
2 实验流程
为使实验结果准确可靠，实验应严格遵循规定的实验流程。在实验进行工程中，要严格按照实验室的相关规定进行操作。
2.1 色谱
色谱的选择应该严格满足实验所需要求。实验应该选用Phenomenex C18色谱柱。
实验应该选择甲醇和0.1mol/L的醋酸铵缓冲液按照65比35的比例制作形成流动相。其中，需要向800ml的水中，加入7.7g的醋酸铵，使之溶解后，再将溶液的PH值调至3.3，之后，加入适量的水，将溶液稀释到1000ml。
实验应该选择波长244nm，波速1.0ml/min的检测波，同时实验的进样量应为10μl。
另外，实验只需在室温条件下进行即可。
2.2 实验溶液的配制
实验所用溶液也按照相关操作、配比后，使之成为实验组和对照组两份溶液样品。
2.2.1 实验组溶液。进行试验之前，应选取20片盐酸氨溴索片，准确称量其重量后，将其研磨成分，再称取10mg的盐酸氨溴索细粉。再把细粉放置在容量瓶中，加流动相至100ml，摇晃使其均匀溶解后，取其滤液作为实验组试液。
2.2.2 对照组溶液。把之前研磨成粉的盐酸氨溴索再取10mg，同样放置在容量瓶中，加入流动相至100ml后，摇晃均匀，不做其他处理。将这部分溶液作为对照组溶液。
2.3 试用性实验
实验过程中，应该按照已经规定好的色谱条件，取实验组溶液和对照组溶液各10μl。把两组溶液均记录在色谱图中。下图1-A为对照组溶液所记录的色谱图，图1-B表明实验中盐酸氨溴索的保留持续时间大概是11分，与其他组分峰的分离度超过了1.5。实验中的理论板书为3300。
2.4 辅料干扰试验
按处方中各辅料的比例配制成不含盐酸氨溴索的空白样品，照“2.2.1”项下方法配制溶液，按给定的色谱条件，取10μl进样，记录色谱图，见图1-C。辅料对盐酸氨溴索峰无干扰。
2.5 线性关系
分别取盐酸氨溴索对照品适量，照“2.2.2”项下方法操作，配制10、20、50、100和150μg/ml对照品溶液，按给定的色谱条件进行测定，记录各浓度的色谱峰面积，以峰面积对溶液浓度求得回归方程为Y=1.15×10^4X+28573，r=0.9992，在10～150μg/ml范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取浓度为100μg/ml的对照品溶液连续进样6次，RSD=0.44%，表明所选定的色谱条件系统稳定。
2.7 实验的重现性
按照之前选择的药品，取同一批次的药品进行前后共5此的测量实验。实验表明，样品盐酸氨溴索片的平均含量大约是药品标识含量的99.2%，RSD=0.18%。实验测得的数据说明，这种实验发放的重现性比较好。
2.8 回收率试验
取處方量的辅料适量，精密称取盐酸氨溴索对照品8、10和12mg各3份，照“2.2.1”项下方法配制溶液，按给定的色谱条件，取10μl进样，记录色谱图，测得平均回收率为99.0%，RSD=0.77%（n=9）。
2.9 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液，按给定的色谱条件在0、2、4、6和8h分别进样测定峰面积，RSD=0.82%，表明样品溶液在8h内稳定。
2.10 样品含量测定
取盐酸氨溴索片3批各20片，称重，研细，照“2.2.1”项下方法操作，按给定的色谱条件，取10μl进样，各批分别进样3次，记录色谱图。另精密称取盐酸氨溴索对照品10mg，置100ml量瓶中，照“2.2.1”项下方法配制溶液，按给定的色谱条件，取10μl进样，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，3批样品含量测定结果，见表3。
3 实验结论
实验结束之后，如果测量得出实验所用流动相中，甲醇的比例较实验进行前减少，说明实验中样品的保留时间较长，消耗也相应增多。如果流动相中，甲醇比例较实验前增加，则说明样品的分离度比较小，所以是实验选用流动相的最佳比例为65个单位的甲醇比35个单位的醋酸铵缓冲液。
结束语
盐酸氨溴索片是临床医学中用于治疗咳痰病症的重要药品，在临床医学中对相关疾病的治疗具有非常显著的改善作用。采用高效液相色谱法对盐酸氨溴索片的含量进行测量，测量实验方法较为简单、快捷，能够为实际制药工作和医学研究工作提供有用的参考。因此，高效液相色谱法测定盐酸氨溴索片含量的方法可被广泛应用。
参考文献
[1]郑芳，朱雪松，师娉嫔，等.盐酸氨溴索注射液与注射用加替沙星的配伍稳定性考察[J].中国药师，2010，13（9）：1367-1368.
[2]国家食品药品监督管理局标准（试行）[S].YBH21062005.
[3]国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京：中国医药科技出版社，2010：225-226，765-768.
[4]王博，李洪起，徐芳，等.HPLC法测定盐酸氨溴索注射液中有关物质[J].现代药物与临床，2012，27（3）：226-228.
[5]宋晓楠，王晓波，袭荣刚，等.高效液相色谱法测定人血浆中盐酸氨溴索的浓度[J].药学实践杂志，2012，30（1）：29-30.