目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因(SLC8A2)对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株(实验组)和稳定表达GFP的U87-NC细胞株(阴性对照组).Transwell小室及预铺50μl Matrigel基质胶的Transwell小室检测SLC8A2对U87细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染该基因后肿瘤细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9及MT1-MMP转录水平的变化,明胶酶谱法检测分泌至细胞培养基中MMP-2酶活性的变化；裸鼠皮下移植瘤实验(5只/组)检测SLC8A2对U87细胞致瘤性的影响.结果 U87-NC和U87-SLC8A2穿过Transwell小室基膜的细胞数分别为(279.70±17.50)个及(4.30±0.58)个,而穿过预铺Matrigel基质胶的Transwell小室基膜的细胞数分别为(274.0±21.3)个和(12.7±1.2)个,差异有统计学意义(P＜0.01)；与U87-NC比较,U87-SLC8A2细胞中MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MTl-MMP的转录水平分别下降了(55.4±3.2)％、(78.7±5.3)％、(79.7±4.6)％、(53.9±3.2)％及(70.9±4.4)％(P＜0.01),且U87-SLC8A2细胞分泌的MMP-2酶活性较U87-NC下降了(93.2±5.1)％(P＜0.01)；接种U87-SLC8A2细胞的裸鼠全都不致瘤,而接种对照组细胞的裸鼠全部致瘤成功.结论 SLC8A2可下调MMP的活性而抑制胶质瘤细胞U87的侵袭迁移能力,并能显著抑制U87细胞在裸鼠体内的生长及增殖。
新候选肿瘤抑制基因溶质载体8号家族中的2号成员基因对胶质瘤细胞株U87的侵袭迁移能力和裸鼠致瘤性的影响
【摘 要】
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目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因(SLC8A2)对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株(实验组)和稳定表达GFP的U87-NC细胞株(阴性对照组).Transwell小室及预铺50μl Matrigel基质胶的Transwell小室检测SLC8A2对U87细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链反应
【机 构】
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215004苏州大学附属第二医院神经外科,郑州大学人民医院神经外科,215004苏州大学附属第二医院神经外科,215004苏州大学附属第二医院神经外科,郑州大学人民医院神经外科
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2013年30期
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