【摘 要】
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为鉴定Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV-Ⅰ）VP1蛋白优势抗原区及建立DHV-Ⅰ抗体检测ELISA方法，本研究以重组质粒pEasy-VP1为模板，将其分为5段（VP1-a～e）及全长VP1经PCR扩增，并分别克隆于pET-32a（＋）进
【基金项目】
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黑龙江省“十二五”科技攻关项目(GA09B302);高校博士学科点专项基金(20102325110004);黑龙江省青年基金(QC04C32)
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为鉴定Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV-Ⅰ）VP1蛋白优势抗原区及建立DHV-Ⅰ抗体检测ELISA方法，本研究以重组质粒pEasy-VP1为模板，将其分为5段（VP1-a～e）及全长VP1经PCR扩增，并分别克隆于pET-32a（＋）进行原核表达。经western blot分析表明，截短表达的蛋白VP1-c（80aa～150aa）抗原性良好。将其纯化作为包被抗原建立了DHV-Ⅰ抗体的间接ELISA检测方法。经反应条件优化确定：VP1-c包被浓度为2μg／mL，DHV-Ⅰ抗血清稀释度为1：20，其临界值为0．208。
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