【摘 要】
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目的建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,AT-Ⅱ)分离、纯化、原代培养及鉴定方法。方法取Wistar大鼠肺脏,采用胰蛋白酶消化法分离AT-Ⅱ,通过差速离心
【机 构】
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军事医学科学院毒物药物研究所; 龙口市人民医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(30800904);“重大新药创新”科技重大专项(2008ZX09305-003)
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目的建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,AT-Ⅱ)分离、纯化、原代培养及鉴定方法。方法取Wistar大鼠肺脏,采用胰蛋白酶消化法分离AT-Ⅱ,通过差速离心法、红细胞裂解法、贴壁选择法、免疫黏附选择法纯化AT-Ⅱ,倒置相差显微镜下观察细胞形态,鞣酸染色法进行细胞鉴定。结果与结论AT-Ⅱ呈单个或岛状生长,细胞呈圆形或椭圆形,细胞浆内有大量的反差明显的细胞小颗粒,细胞核明显。鞣酸染色法鉴定阳性。通过改进的酶消化法获得的AT-Ⅱ生长状态良好,纯度高,符合体外实验要求。
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