蓝杆藻ATCC 51142中α-酮戊二酸脱羧酶的克隆与表达

来源 :江苏农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mmtt001

【摘要】

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α-酮戊二酸脱羧酶催化α-酮戊二酸的非氧化脱羧生成琥珀酸半醛,其在琥珀酸半醛脱氢酶的作用下转化为琥珀酸,蓝藻的三羧酸循环由于这2个酶的存在而变得完整。Blast序列分析发

【作者】

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谢琮琮许文武李至敏王小琴雷国风张伟黄

【机构】

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江西农业大学生物科学与工程学院,江西农业大学理学院

【出处】

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江苏农业科学

【发表日期】

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2018年19期

【关键词】

：

蓝杆藻ATCC 51142 α-酮戊二酸脱羧酶基因克隆重组表达蛋白质纯化

【基金项目】

：

国家自然科学基金(编号:31560250、31400054);江西省自然科学基金重大项目(编号:20161ACB21012);江西省教育厅科技研究重点项目(编号:GJJ160353);江西农业大学国家级大学生创新创业训练项目(编号:201710410005)

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α-酮戊二酸脱羧酶催化α-酮戊二酸的非氧化脱羧生成琥珀酸半醛,其在琥珀酸半醛脱氢酶的作用下转化为琥珀酸,蓝藻的三羧酸循环由于这2个酶的存在而变得完整。Blast序列分析发现,蓝杆藻ATCC51142中cce4227基因编码α-酮戊二酸脱羧酶。为了证实cce4227基因编码蛋白的催化功能,从蓝杆藻ATCC51142基因组中克隆cce4227基因,然后构建pET28a-cce4227表达质粒。将该质粒与pTf16分子伴侣质粒共转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞后进行重组蛋白的诱导表达。利用镍亲和层析方法

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