【摘 要】
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目的 检测结直肠癌（colorectal cancer, CRC）患者血清外泌体KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA相关基因位点的突变，分析其与癌组织基因突变的一致性及其可能的影响因素。方法 2019年2月～2021年1月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院100例结直肠癌患者作为研究对象。提取患者血清外泌体，并用蛋白免疫印迹（Western blot,WB）法检测外泌体标志物CD63和T
【基金项目】
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联勤保障部队第九二〇医院院内科技计划《外泌体DNA检测指导大肠癌患者个体化治疗的可行性研究》,课题编号：2019YGC01；
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目的 检测结直肠癌（colorectal cancer, CRC）患者血清外泌体KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA相关基因位点的突变，分析其与癌组织基因突变的一致性及其可能的影响因素。方法 2019年2月～2021年1月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院100例结直肠癌患者作为研究对象。提取患者血清外泌体，并用蛋白免疫印迹（Western blot,WB）法检测外泌体标志物CD63和TSG101的蛋白表达；聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测血清外泌体及手术切除的癌组织中KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA基因突变情况，Kappa一致性检验分析血清外泌体突变与组织突变的一致性，Logistic单因素回归分析影响一致性的因素。结果 癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据显示，KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA的结直肠癌突变率分别为35%～96%,5%～15%,5%～30%和18%～36%，且KRAS和BRAF的突变与结直肠癌患者的低存活率有关。血清外泌体中KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA的突变率分别为94.00%,11.00%,17.00%和35.00%；结直肠癌组织KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA的突变率分别为34.00%,5.00%,6.00%和16.00%；血清外泌体中KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA的突变率均高于组织，差异有统计学意义（χ2=101.027～256.250，均P ＜0.05）。血清外泌体与组织中KRAS突变的一致率为40.00%（Kappa值=0.064,P＞0.05）,BRAF突变的一致率为99.00%（Kappa值=0.599,P＜0.05）,NRAS突变的一致率为89.00%（Kappa值=0.475,P＜0.05）,KRAS突变的一致率为81.00%（Kappa值=0.523,P＜0.05）。ECOG评分、转移、临床分期是影响外泌体和组织KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA的突变检测一致性的因素。结论 结直肠癌患者血清外泌体KRAS,BRAF,NRAS和PIK3CA的突变率高于组织，二者BRAF,NRAS和PIK3CA的一致性中等，为外泌体的基因检测指导临床靶向治疗提供参考。
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