【摘 要】
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目的 探讨化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)对小鼠视网膜神经节细胞(RGC)中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其下游调控的抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)表达的影响.方法 以小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5为研究对象,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞生长活性筛选最适CoCl2作用浓度;最适浓度的CoCl2作用RGC-5细胞2、6、12、24h,Western Blot检测细胞内总的及细胞核内Nrf2蛋白的表达;Real-time RT-PCR检测SOD和CAT的mRNA表达.结
【机 构】
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沈阳市第四人民医院眼科,辽宁沈阳,110031
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目的 探讨化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)对小鼠视网膜神经节细胞(RGC)中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其下游调控的抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)表达的影响.方法 以小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5为研究对象,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞生长活性筛选最适CoCl2作用浓度;最适浓度的CoCl2作用RGC-5细胞2、6、12、24h,Western Blot检测细胞内总的及细胞核内Nrf2蛋白的表达;Real-time RT-PCR检测SOD和CAT的mRNA表达.结果 最适CoCl2浓度为200μmol/L,CoCl2作用2hRGC-5细胞内和细胞核内Nrf2蛋白表达水平开始上调,6h达高峰,12h下降,24h恢复正常.而CoCl2作用2h,SOD和CATmRNA在RGC-5细胞表达水平开始上升,12h达高峰,24h开始回落但仍高于正常组.结论 化学性低氧模拟剂CoCl2能够诱导细胞内Nrf2蛋白表达,促其转位进入细胞核,上调其介导的抗氧化酶SOD和CAT基因的转录.
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