【摘 要】
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目的构建一个能在原核高效表达人白细胞介素-13(HIL-13)的系统.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得HIL-13的cDNA,将其克隆至原核表达载体pGEX-2T后进行诱导表达.结果合
【机 构】
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中国协和医科大学硕士研究生;中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所,北京,100005
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目的构建一个能在原核高效表达人白细胞介素-13(HIL-13)的系统.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得HIL-13的cDNA,将其克隆至原核表达载体pGEX-2T后进行诱导表达.结果合成了特异编码HIL-13的cDNA,构建了原核表达质粒pGEX-2T HIL-13,对其进行序列分析表明,表达质粒中的插入片段为HIL-13基因;诱导表达出含有HIL-13的融合蛋白谷光苷肽-S-转移酶-HIL-13(GST-HIL-13),其相对分子质量为39 000.结论 (1)从T淋巴细胞中克隆出HIL-13基因.(2)HIL-13 cDNA在原核细胞表达的蛋白占菌体总蛋白的37%.
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