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利用Primer primer5．0软件设计两条引物，将loxP位点分别引入正、反向引物，以质粒载体pIRES—gpt为模板，扩增获得LoxP—CMV—gpt—IRES—LoxP基因表达盒（约2．9kb），将其克隆入质粒pBUS10（含有MDV US10区）的BalⅠ位点，获得重组质粒pUS—gptIRES（L）；对重组质粒pUS—gptIRES（L）进行测序分析，发现两同向的loxP位点正确插入到pUS—gptIRES（L）中；将含有完整的GFP基因以及poly A尾的基因片段，连入pUS—gptIRE