新孢子虫NcGRA2基因真核表达质粒的构建及其在293细胞内的表达

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[目的]为了构建新孢子虫Nc GRA2基因的真核表达载体,探讨重组载体在体外细胞的表达。[方法]从含有Nc GRA2基因的重组质粒p GEX-4T1-Nc GRA2中,用限制性内切酶进行酶切获得带有粘性末端的Nc GRA2基因片段。经琼脂糖凝胶电泳切胶回收Nc GRA2基因片段,与pc DNA3.1载体连接。将构建的真核表达质粒pc DNA3.1-Nc GRA2转染到293细胞中表达。[结果]经酶切分析和序列测定,证实了重组质粒的正确连接。经免疫荧光抗体试验验证pc DNA3.1-Nc GRA2能在293
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