【摘 要】
：
目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)KUCG1在肾癌舒尼替尼耐药中的作用.方法:qPCR检测舒尼替尼耐药的肾癌细胞KUCG1表达变化.CCK-8、侵袭实验和流式细胞术分析KUCG1对肾癌细胞增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响.Western blot分析KUCG1对PTEN/AKT/mTOR通路的影响.qPCR检测KUCG1周围基因变化,并研究MAGEA11对肾癌细胞生物学行为的影响.结果:与正常肾癌细胞相比,耐药的肾癌细胞KUCG1表达明显下降.体外试验结果显示,KUCG1表达下调后细胞增殖、侵袭和耐
【机 构】
：
江苏大学附属医院,镇江212001
论文部分内容阅读
目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)KUCG1在肾癌舒尼替尼耐药中的作用.方法:qPCR检测舒尼替尼耐药的肾癌细胞KUCG1表达变化.CCK-8、侵袭实验和流式细胞术分析KUCG1对肾癌细胞增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响.Western blot分析KUCG1对PTEN/AKT/mTOR通路的影响.qPCR检测KUCG1周围基因变化,并研究MAGEA11对肾癌细胞生物学行为的影响.结果:与正常肾癌细胞相比,耐药的肾癌细胞KUCG1表达明显下降.体外试验结果显示,KUCG1表达下调后细胞增殖、侵袭和耐药性增强,凋亡受抑制.KUCG1表达下调可抑制PTEN表达,激活AKT/mTOR通路.KUCG1下调可通过上调其周围MAGEA11表达,抑制PTEN表达,激活AKT/mTOR通路.MAGEA11下调后肾癌细胞增殖、侵袭能力下降,凋亡增强.结论:KUCG1表达下调通过上调MAGEA11表达调节PTEN/AKT/mTOR通路,促进ccRCC舒尼替尼耐药,有望成为ccRCC分子靶向药物耐药的预后标志物和潜在治疗靶点.
其他文献
目的:探讨土荆皮乙酸(PAB)对TGF-β1介导的人肺癌细胞A549上皮-间质转化(EMT)及侵袭能力的影响及作用机制.方法:采用Transwell小室实验检测PAB对A549细胞迁移、侵袭能力的影响.免疫荧光法检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-Cad)表达.Western blot检测上皮相关标志物E-Cad、α-连环蛋白(α-CA)、间质相关标志物波形蛋白(Vim)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达.RT-qPCR法检测上皮及间质蛋白标志物α-CA
目的:研究温胆汤对睡眠剥夺小鼠的改善作用以及对小鼠氧化应激和炎症水平的影响.方法:将30只SPF级昆明雌性小鼠随机分为5组:对照组、模型组、温胆汤低浓度组(含生药0.5 g/ml)、温胆汤高浓度组(含生药2 g/ml)和艾司唑仑片组(0.15 mg/kg),每组6只.采用改良版水平转盘睡眠剥夺法构建失眠小鼠模型,记录小鼠行为学改变(精神状态、饮食)、毛发和体质量.药物持续灌胃7 d,1次/d.处死小鼠,收集血清,分离脑组织.流式检测小鼠脑组织活性氧(ROS)水平;生化检测小鼠血清和脑组织谷胱甘肽过氧化物酶
目的:探讨TRIM19在卵巢癌进展中的作用及其分子机制.方法:qPCR检测人卵巢表皮细胞IOSE80、卵巢癌细胞SKOV-3、A2780、OVCAR3中TRIM19表达水平;以siRNA敲减SKOV-3细胞中TRIM19基因表达;以CCK-8方法、Transwell实验、流式细胞术分别检测细胞增殖能力、迁移行为及凋亡率;以RT-qPCR技术检测信号通路分子表达.结果:在卵巢癌细胞SKOV-3、A2780、OVCAR3中,TRIM19表达量较正常表皮细胞IOSE80中明显增强.当TRIM19基因在卵巢癌SK
目的:探讨桑黄酸性多糖(PIP-A)对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠的免疫调节作用.方法:采取水提醇沉法提取桑黄总多糖(PIP),并利用DEAE-纤维素柱(7.5 cm×30 cm,CI型)进行分级,获得PIP-A并测定其单糖组成;采用D-gal(200 mg/kg)构建小鼠衰老模型,将小鼠随机分成4组,分别为空白组(CON组,灌胃蒸馏水,背颈部皮下注射生理盐水)、模型组(MOD组,灌胃蒸馏水,背颈部皮下注射200 mg/kg D-gal)、阳性对照组(PC组,灌胃800 mg/kg吡拉西坦,背颈部皮下
目的:探讨紫草素对病毒感染的影响及其作用机制.方法:C57BL/6J小鼠用水疱性口炎病毒(VSV)感染后,不同浓度紫草素通过腹腔注射处理小鼠,观察小鼠的生存率以及肝、脾和肺组织中的VSV病毒滴度和VSV-G病毒基因的转录水平变化;H&E组化实验检测肺部组织的损伤和炎症细胞的浸润.RT-PCR检测小鼠肝脏、脾脏及肺中IFN-β和IL-6的mRNA表达.在细胞实验中,用VSV病毒感染经不同浓度紫草素预处理的原代巨噬细胞,利用RT-PCR及ELISA实验方法检测IFN-α和IFN-β的mRNA水平及蛋白水平.W
目的:探究骨关节炎(OA)的免疫机制,挖掘其潜在干预中药.方法:通过GEO数据库获取OA滑膜组织相关基因探针,以正常人群滑膜组织为对照组,采用R软件识别差异表达基因并进行功能相关分析,采用STRING数据库对差异基因进行蛋白网络互作(PPI)分析,并筛选核心靶基因,通过CIBERSORT反卷法计算免疫细胞浸润情况及相关性,采用COREMINE数据库对显著富集的免疫相关生物学过程及核心靶基因进行中药预测.结果:共筛选出716个差异基因,其中上调基因382个,下调基因334个;差异基因PPI涉及IL-6、CX
目的:探究帕瑞昔布钠对宫颈癌HeLa细胞环氧化合酶-2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)通路及其上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响.方法:磺酰罗丹明B(SRB)法检测帕瑞昔布钠在不同浓度和时间点对HeLa细胞存活率的影响,筛选出合适的浓度和时间点.将Hela细胞分为帕瑞昔布钠0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L组,处理24 h后,Transwell小室法检测各组细胞迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞中通路蛋白COX-2、PG
目的:分析胰腺癌患者肿瘤组织B7-H4表达水平与术前血清中癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)199及CA242等肿瘤标志物表达水平的相关性,同时探讨其在胰腺癌中的临床应用价值.方法:采用抗人B7-H4单克隆抗体免疫组化染色方法测定188例胰腺癌患者手术切除组织中B7-H4表达水平.同时利用电化学发光法检测术前血清中CEA、CA199及CA242浓度.结果:胰腺癌患者术前血清CEA水平与胰腺癌原发灶、淋巴结及远端转移分期(TNM)及远端转移相关(P<0.05).胰腺癌患者术前血清CA199及CA242水平
目的:探讨miR-589-3p靶向牙本质涎磷蛋白(DSPP)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤干细胞增殖、凋亡、侵袭的影响.方法:对OSCC患者和口腔良性肿物患者组织中miR-589-3p和DSPP的表达进行检测,对miR-589-3p和DSPP的相关性进行分析.双荧光素酶报告实验验证miR-589-3p与DSPP的靶向关系.免疫磁珠分选技术分选OSCC肿瘤干细胞,干预肿瘤干细胞中miR-589-3p和DSPP的表达,将细胞分为mimics control组、mimics miR-589-3p组、inhib
目的:探究四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响,并探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制.方法:灌胃给予SD大鼠不同剂量四妙勇安水煎液制备含药血清.油红O染色观察泡沫化巨噬细胞脂滴变化;CCK-8法观察含药血清对泡沫巨噬细胞活化的影响;ELISA检测炎症性细胞因子IL-6、IL-10和IFN-γ表达;透射电镜观察细胞自噬水平;免疫荧光标记法检测LC3Ⅱ表达;RT-PCR及Western blot检测细胞AMPK/mTOR/p70S6K通路相关因子表达变化.结果:油红O染色显