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番茄丛矮病毒(ToBSV)是我国进境植物检疫对象,也是进境种子苗木等必检项目。该病毒能侵染番茄、曼陀罗、葡萄、豇豆等20余科120余种植物。该研究根据ToBSV全基因组中p33蛋白基因,设计引物和TaqMan探针,建立了半巢式实时PCR检测ToBSV的新方法。该研究巧妙地融合了巢式PCR和TaqMan探针技术,第二步半巢式一RT-RealtimePCR既进一步放大了第一步检测信号,也是对第一步PCR产物的确认,与单一的巢式PCR或ReMtimePCR等方法相比其检测的准确性、灵敏度更高。该方法检测灵敏度可