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摘 要：甘草具有多种药用功效，自古以来就是一味重要的药材。本文简要探讨对甘草中有效成分的分离提取方法，以期为甘草的研究与应用提供参考依据。
关键词：甘草 有效成分 分离与提取
一、甘草简介
甘草属于豆科多年生草本植物。作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。
二、甘草中的有效成分
1.甘草甜素
甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。它的甜度是蔗糖的2～3百倍。它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。
2.甘草次酸
甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。
3.甘草黄酮
甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。
4.甘草多糖
它是将甘草提纯后获得的一种α-D-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。
三、甘草有效成分的提取方法
1.甘草酸的提取方法
1.1溶剂提取法
指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。
1.2超声提取法
根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。
1.3微波提取法
该法又称为微波萃取法（MAE），是将传统的溶剂提取法与微波技术融合而形成的新技术。它具有多种优点，包括省时、快捷、易操作、低耗能、效率高。具体原理如下：在微波场内，不同的基体物质对微波的吸收能力各不相同，因此，会选择性加热基体物质的个别区域或萃取体系中的个别组分。这样，被萃取物质最终由基体或原体系中分离出来，进入到相应的萃取剂内。这里的萃取剂要求介电常数小、对微波吸收能力弱。王巧娥等人利用中型微波萃取设备，结合均匀设计方法制定有效的提取方案：当使用微波萃取54分钟后，取得的甘草酸差不多和采用索氏提取4h，然后，在室温条件下冷浸约44.3h后的效果相当。
1.4超临界CO2萃取法
超临界流体萃取技术（SFE）是指在萃取与分离植物的有效成分时，采用超临界流体（SCF或SF）取代常规有机溶剂[2]。具体原理是根据超临界流体具有的溶解能力和自身密度间的联系。简而言之，借助压力与温度的改变对超临界流体溶解能力产生的影响而达到萃取目的。CO2安全无毒，无污染、廉价，并且在室温条件下即可进行。因此，采用超临界CO2萃取法提纯甘草的有效成分是不错的选择。
2.甘草次酸的提取方法
2.1煎煮法
将适量的甘草粗粉放入水中加热煮沸，提取三次。当水提取液浓缩为原体积的1/3，再加入5%稀硫酸并加热回流。然后，水解大约10h，再进行抽滤，将其水洗到中性为止，干燥。再将其放入20ml热三氯甲烷中，并趁热过滤，冷却滤液。当上柱层析，重结晶后，便得到甘草次酸结晶。
2.2超声波提取法
取10g甘草粗粉，粉碎粒度约为18-20目，溶剂选择70%乙醇溶液，将甘草粗粉浸泡到溶剂中约90min，超声频率为20kHz，开启超声波1h，离心，取上清液，通过D101大孔树脂对甘草酸进行纯化，再通过酸性加压水解后便得到甘草次酸。
2.3纤维素酶-超声波联用提取法
具体方法为：取甘草粗粉10g，粉碎粒度为50目，选用70%乙醇，并加入硫酸溶液将pH值调至4，然后放入纤维素酶（活力单位在2000U/g），将其充分搅拌，利用超声频率为40kHz的超声波，作用45min。通过离心。取上清液，纯化，酸性加压水解即可。
3.甘草多糖的提取方法
目前，常用的方法包括溶剂提取法、微波萃取法、超声法及酶法等。
4.甘草黄酮的提取方法
甘草中甘草黄酮类的质量分数大约是0.5%-4%。采用水提法与溶剂提取法是现在提取甘草黃酮的常见方法，技术也比较成熟。不过，目前，各种新提取法也正逐渐兴起，如超声波、微波、超临界提取、加压热水提取法等。
溶剂萃取法提取甘草黄酮主要分为两种：无机溶剂萃取法与有机溶剂萃取法。它的作用原理是根据甘草黄酮可溶于一些溶剂的特性来获取甘草黄酮，如甲醇、碱水等有机溶剂。而有机溶剂萃取法属于当前世界上提取甘草黄酮的主要途径之一，一般采用冷浸法或加热抽提法，通常利用甲醇或乙醇作为浸提液。首先选择甘草粉末约20-40目，选用浓度为75%-80%的乙醇或80%-85%的甲醇先后提取三次，每次时间在1-1.5h左右，然后，将提取液合并，减压浓缩，便可得到浸膏。再把7-8倍的水加入到浸膏中。然后，搅拌、放置、过滤。用大孔树脂纯化滤液，再用水洗去杂质，再采用60%乙醇洗脱，将洗脱液浓缩、干燥后便得到甘草黄酮。
另外，还有一种溶剂热水浴法提取甘草黄酮：把NaOH与乙醇混合溶液作为浸提液提取甘草黄酮，经有关试验结果可知最适宜的工艺条件为乙醇浓度为75%，NaOH溶液浓度为0.4mol/L，二者比例取2：1，回流时间在2.5-3h左右。在获得甘草浸提液后，根据相比把有机相与一定pH值的甘草浸提液放入离心管内。然后，在振荡器的水浴中先预热约20min，震荡约半小时，再静置半小时，离心，过滤即可。
参考文献
[1]刘育辰，王文全 ，郭洪祝.甘草有效成分的提取纯化方法研究进展[J].中成药，2010，32（11）：1953-1957.
[2]王伟明 ，朱文全 ，张志波.甘草有效成分提取分离方法的研究进展[J].黑龙江医药，2010，（1）：93-94.
关键词：甘草 有效成分 分离与提取
一、甘草简介
甘草属于豆科多年生草本植物。作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。
二、甘草中的有效成分
1.甘草甜素
甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。它的甜度是蔗糖的2～3百倍。它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。
2.甘草次酸
甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。
3.甘草黄酮
甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。
4.甘草多糖
它是将甘草提纯后获得的一种α-D-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。
三、甘草有效成分的提取方法
1.甘草酸的提取方法
1.1溶剂提取法
指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。
1.2超声提取法
根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。
1.3微波提取法
该法又称为微波萃取法（MAE），是将传统的溶剂提取法与微波技术融合而形成的新技术。它具有多种优点，包括省时、快捷、易操作、低耗能、效率高。具体原理如下：在微波场内，不同的基体物质对微波的吸收能力各不相同，因此，会选择性加热基体物质的个别区域或萃取体系中的个别组分。这样，被萃取物质最终由基体或原体系中分离出来，进入到相应的萃取剂内。这里的萃取剂要求介电常数小、对微波吸收能力弱。王巧娥等人利用中型微波萃取设备，结合均匀设计方法制定有效的提取方案：当使用微波萃取54分钟后，取得的甘草酸差不多和采用索氏提取4h，然后，在室温条件下冷浸约44.3h后的效果相当。
1.4超临界CO2萃取法
超临界流体萃取技术（SFE）是指在萃取与分离植物的有效成分时，采用超临界流体（SCF或SF）取代常规有机溶剂[2]。具体原理是根据超临界流体具有的溶解能力和自身密度间的联系。简而言之，借助压力与温度的改变对超临界流体溶解能力产生的影响而达到萃取目的。CO2安全无毒，无污染、廉价，并且在室温条件下即可进行。因此，采用超临界CO2萃取法提纯甘草的有效成分是不错的选择。
2.甘草次酸的提取方法
2.1煎煮法
将适量的甘草粗粉放入水中加热煮沸，提取三次。当水提取液浓缩为原体积的1/3，再加入5%稀硫酸并加热回流。然后，水解大约10h，再进行抽滤，将其水洗到中性为止，干燥。再将其放入20ml热三氯甲烷中，并趁热过滤，冷却滤液。当上柱层析，重结晶后，便得到甘草次酸结晶。
2.2超声波提取法
取10g甘草粗粉，粉碎粒度约为18-20目，溶剂选择70%乙醇溶液，将甘草粗粉浸泡到溶剂中约90min，超声频率为20kHz，开启超声波1h，离心，取上清液，通过D101大孔树脂对甘草酸进行纯化，再通过酸性加压水解后便得到甘草次酸。
2.3纤维素酶-超声波联用提取法
具体方法为：取甘草粗粉10g，粉碎粒度为50目，选用70%乙醇，并加入硫酸溶液将pH值调至4，然后放入纤维素酶（活力单位在2000U/g），将其充分搅拌，利用超声频率为40kHz的超声波，作用45min。通过离心。取上清液，纯化，酸性加压水解即可。
3.甘草多糖的提取方法
目前，常用的方法包括溶剂提取法、微波萃取法、超声法及酶法等。
4.甘草黄酮的提取方法
甘草中甘草黄酮类的质量分数大约是0.5%-4%。采用水提法与溶剂提取法是现在提取甘草黃酮的常见方法，技术也比较成熟。不过，目前，各种新提取法也正逐渐兴起，如超声波、微波、超临界提取、加压热水提取法等。
溶剂萃取法提取甘草黄酮主要分为两种：无机溶剂萃取法与有机溶剂萃取法。它的作用原理是根据甘草黄酮可溶于一些溶剂的特性来获取甘草黄酮，如甲醇、碱水等有机溶剂。而有机溶剂萃取法属于当前世界上提取甘草黄酮的主要途径之一，一般采用冷浸法或加热抽提法，通常利用甲醇或乙醇作为浸提液。首先选择甘草粉末约20-40目，选用浓度为75%-80%的乙醇或80%-85%的甲醇先后提取三次，每次时间在1-1.5h左右，然后，将提取液合并，减压浓缩，便可得到浸膏。再把7-8倍的水加入到浸膏中。然后，搅拌、放置、过滤。用大孔树脂纯化滤液，再用水洗去杂质，再采用60%乙醇洗脱，将洗脱液浓缩、干燥后便得到甘草黄酮。
另外，还有一种溶剂热水浴法提取甘草黄酮：把NaOH与乙醇混合溶液作为浸提液提取甘草黄酮，经有关试验结果可知最适宜的工艺条件为乙醇浓度为75%，NaOH溶液浓度为0.4mol/L，二者比例取2：1，回流时间在2.5-3h左右。在获得甘草浸提液后，根据相比把有机相与一定pH值的甘草浸提液放入离心管内。然后，在振荡器的水浴中先预热约20min，震荡约半小时，再静置半小时，离心，过滤即可。
参考文献
[1]刘育辰，王文全 ，郭洪祝.甘草有效成分的提取纯化方法研究进展[J].中成药，2010，32（11）：1953-1957.
[2]王伟明 ，朱文全 ，张志波.甘草有效成分提取分离方法的研究进展[J].黑龙江医药，2010，（1）：93-94.