【摘 要】
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目的 探究灵芝提取物通过抑制miR-143-3p对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的PC12细胞损伤的影响。方法 使用20μmol/L的Aβ25-35处理PC12细胞用于建立体外Alzheimer’s病模型，细胞分为空白组(未经Aβ25-35处理细胞)、模型组(经过Aβ25-35处理细胞24 h)、低剂量组(2.5 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、中剂量组(5.0 mg/
【基金项目】
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温州市科技局课题（Y20210507）；
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目的 探究灵芝提取物通过抑制miR-143-3p对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的PC12细胞损伤的影响。方法 使用20μmol/L的Aβ25-35处理PC12细胞用于建立体外Alzheimer’s病模型，细胞分为空白组(未经Aβ25-35处理细胞)、模型组(经过Aβ25-35处理细胞24 h)、低剂量组(2.5 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、中剂量组(5.0 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、高剂量组(10 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、miR-NC+高剂量组(转染miR-NC后，使用10 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、miR-143-3p+高剂量组(转染miR-143-3p后，使用10 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)。用噻唑蓝检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡；Western Blotting法检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved-caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白（Bax蛋白）的表达；ELISA检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、Aβ、TNF-α、IL-6水平；实时定量RT-PCR（qRT-PCR）检测miR-143-3p表达水平。结果 与空白组相比，模型组细胞活性、SOD活性、CAT活性显著降低，凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达、Bax蛋白表达、MDA含量、Aβ、TNF-α、IL-6水平以及miR-143-3p表达水平显著增加（均P＜0.05）。与模型组相比，低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞活性、SOD活性、CAT活性显著增加，凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达、Bax蛋白表达、MDA含量、Aβ、TNF-α、IL-6水平以及miR-143-3p表达水平显著降低（均P＜0.05）。与miR-NC+高剂量组相比，miR-143-3p+高剂量组miR-143-3p表达水平、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达、凋亡率、MDA含量、Aβ、TNF-α、IL-6水平显著增加，细胞活性、SOD活性、CAT活性显著降低（均P＜0.05）。结论 灵芝提取物可能通过下调miR-143-3p减弱Aβ25-35诱导的神经细胞凋亡、氧化应激和炎症反应。
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