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背景:研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞,但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。目的:探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法,及其在原代培养过程中的数量和功能变化。方法:借助胶原酶消化法、密度梯度离心法和Hoechst33342染料外排法初筛SP细胞,将初筛细胞置于条件培养基分离培养,后续应用流式细胞分析及分选技术,进一步分离纯化肺鳞癌干细胞。实验结合 CD133和CD44鉴定目标细胞,计数第1代和第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细