【摘 要】
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通过构建重组菌株PE-ATS(BL21)表达可催化底物合成西格列汀的转氨酶,采用摇瓶正交和单因素实验确定发酵培养基的最佳条件为甘油9.0 g/L,酵母粉16.0 g/L、硫酸铵4.0 g/L、氯化
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通过构建重组菌株PE-ATS(BL21)表达可催化底物合成西格列汀的转氨酶,采用摇瓶正交和单因素实验确定发酵培养基的最佳条件为甘油9.0 g/L,酵母粉16.0 g/L、硫酸铵4.0 g/L、氯化钠6.0 g/L、磷酸氢二钠2.0 g/L、磷酸二氢钾3.0 g/L;最佳表达条件为36℃、0.6 mmol/L IPTG诱导4 h。该条件下,摇瓶培养菌液OD600=6.63,SDS-PAGE分析显示酶表达量约占可溶蛋白总量的50%,酶活为758 U/L。
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