【摘 要】
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为了建立坦布苏病毒（TMUV）感染鸭群的抗体检测方法,以TMUV NS1的原核表达蛋白质作为包被抗原,建立了间接ELISA方法,并对该方法进行了检测条件的优化。将TMUV NS1全基因序列克隆
【机 构】
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山东农业大学动物科技学院,山东畜牧兽医职业学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(31272583;31472199);国家水禽产业技术体系项目(CARS-43-10);山东省科技发展计划项目(2014GNC111023)
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为了建立坦布苏病毒（TMUV）感染鸭群的抗体检测方法,以TMUV NS1的原核表达蛋白质作为包被抗原,建立了间接ELISA方法,并对该方法进行了检测条件的优化。将TMUV NS1全基因序列克隆至pET-28a（＋）,利用BL21（DE3）表达NS1蛋白,纯化后其质量浓度为4.16μg·μL-（-1）。通过方阵试验,确定了NS1蛋白的最佳包被质量浓度是100ng·孔-1,检测血清的最佳稀释倍数为40倍。随后对检测条件进行了优化,优化后的结果：抗原的最佳包被条件是4℃作用过夜;酶标二抗的最
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