胸膜肺炎放线杆菌apxⅡCA基因的克隆、表达及ApxⅡ-ELISA检测方法的初步建立

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chinasee_liang
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根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌(APP)ApxⅡ的基因序列设计了1对引物,从我国APP武汉株扩增出约3.5kb的apxⅡCA基因.测序结果表明,该基因的大小与国外已报道的1型和9型APP的apxⅡCA基因大小一致,同源性达99%.将该基因连接到原核表达载体pET-17b,构建了原核表达质粒pET-apxⅡCA,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出了大小约105 000的ApxⅡ蛋白.提取包涵体蛋白作为抗原包被ELISA酶标板,对已知阳性、阴性血清和临床送检血清样品进行了ELISA检测,从而为最终建立A
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