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目的探讨p53核酶对肝癌细胞突变型抑癌基因p53的抑制作用. 方法应用计算机设计并合成针对突变型p53(249位密码子AGG→AGT)的锤头状核酶RZ,构建其体外转录和真核表达载体,检测核酶对突变型p53(mtp53)的体外切割作用,并在Lipofect AMINETM2000的介导下转染肝癌细胞MHCC97,应用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)检测核酶对肝癌细胞突变型p53的抑制作用. 结果测序证实核酶基因被正确克隆入体外转录载体pBSKU6和真核载体pEGFPC1中.体外切割效率为42%,而野生型p53(wtp53)没有被切割.在LipofectAMINETM2000的介导下成功转染肝癌细胞MHCC97, RT-PCR检测证实突变型p53的mRNA水平明显下降,细胞内的切割效率为69%. 结论 p53核酶可成功抑制肝癌细胞中突变型p53的表达,为肝癌的基因治疗提供了一个新的选择.