【摘 要】
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目的:探求热变性蛋白质复性的可能性及其理论机制.方法:8 mol/L脲溶液中,用巯基乙醇将热失活菠萝蛋白酶中的二硫键还原,使其酶分子转变成随机卷曲构象,除去变性剂,用氧化型谷
【机 构】
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贵阳医学院临床生化教研室,贵阳医学院附院生化科
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目的:探求热变性蛋白质复性的可能性及其理论机制.方法:8 mol/L脲溶液中,用巯基乙醇将热失活菠萝蛋白酶中的二硫键还原,使其酶分子转变成随机卷曲构象,除去变性剂,用氧化型谷胱甘肽(GSSG)氧化菠萝蛋白酶分子,让已发生热失活的酶复性.结果:在酶蛋白浓度为0.083 g/L,pH 8 0～8.5时,菠萝蛋白酶可以恢复原有活性的44%.结论:证明了酶分子热失活机制的正确性,酶分子的天然活性构象为能量最低状态,由于动力学能障,热失活的构象不能自动回复成天然活性构象.
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