【摘 要】
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目的 探究lncRNA NEAT1调控女性滋养层细胞增殖的作用和机制,为理解由于滋养层细胞增殖障碍而导致的妊娠疾病提供科学依据.方法 以女性绒毛膜滋养层细胞Swan 71为研究对象,采
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院/华西第四医院,四川成都610041
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目的 探究lncRNA NEAT1调控女性滋养层细胞增殖的作用和机制,为理解由于滋养层细胞增殖障碍而导致的妊娠疾病提供科学依据.方法 以女性绒毛膜滋养层细胞Swan 71为研究对象,采用小干扰RNA和过表达质粒分别转染细胞24 h或6 h,采用逆转录-实时荧光定量PCR验证干扰和过表达效率,采用逆转录-实时荧光定量PCR和Western blot分别检测lncRNA NEAT1对P21和CDK2的mRNA和蛋白表达水平的影响,通过EdU方法检测lncRNA NEAT1对滋养层细胞增殖的影响,采用两独立样本t检验法进行两组间数据的比较.结果 将lncRNA NEAT1敲低至28.5％(t=7.526,P=0.0172)后,P21的mRNA 和蛋白表达水平分别下调至54.1％(t=5.178,P =0.014)和53.8％(t= 6.262,P = 0.0033)、CDK2的mRNA 和蛋白水平分别上调至4.24倍(t = 12.86,P = 0.006)和2.79倍(t = 8.236,P =0.0037),滋养层细胞增殖能力增强;过表达lncRNA NEAT1至169倍(t = 10.81,P = 0.0085)后,P21的mRNA和蛋白水平分别上调至2.89倍(t = 9.435,P = 0.025)和1.89倍(t = 7.077,P= 0.0058),CDK2的mRNA和蛋白水平分别下调至35.6％(t=9.109,P=0.0028)和31.1％(t = 12.64,P = 0.0062),滋养层细胞增殖能力减弱.结论 LncRNA NEAT1可促进P21并抑制CDK2的表达,进而抑制女性滋养层细胞的增殖能力,揭示了lncRNA NEAT1可能作为由于抑制滋养层细胞增殖功能而导致的妊娠疾病的重要调控分子.
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