【摘 要】
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目的探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）基因沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将Skp2 RNA干扰表达载体转染至SPC-A-1肺癌细胞中,G418筛选获得阳性克隆细胞。通过实时荧光定量（RT-P
【机 构】
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重庆市沙坪坝区人民医院内科,重庆医科大学附属第一医院呼吸危重病科
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目的探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）基因沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将Skp2 RNA干扰表达载体转染至SPC-A-1肺癌细胞中,G418筛选获得阳性克隆细胞。通过实时荧光定量（RT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺癌细胞中Skp2的表达。采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组肺癌细胞生长、凋亡情况。结果转染Skp2 shRNA表达载体的肺癌细胞中Skp2蛋白表达量明显减少,抑制效率分别可达75.3±5.1,70.4±3.2;转染Skp2 shRNA表达载体的肺癌细胞生长减慢,阻滞于G1期的增多,S期细胞减少。Skp2 shRNA转染质粒组凋亡率较阴性对照组明显增加,细胞凋亡率分别为（17.5±2.8）%、（15.6±3.1）%。结论通过特异性沉默Skp2基因的表达,可有效降低肺癌细胞中Skp2蛋白表达水平,抑制肺癌细胞生长及增加细胞凋亡。
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