【摘 要】
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将编码枯草芽孢杆菌AS1.398的中性蛋白酶功能区和包含前导区序列('pro'序列)在内的全长基因克隆到酵母整合型质粒pPIC9K中,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母SMD1168,
【基金项目】
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云南省科技攻关项目(2001GG23)资助.
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将编码枯草芽孢杆菌AS1.398的中性蛋白酶功能区和包含前导区序列('pro'序列)在内的全长基因克隆到酵母整合型质粒pPIC9K中,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母SMD1168,通过MD-G418平板、PCR方法筛选和鉴定重组子.重组子发酵液经SDS-PAGE分析和酶活测定表明,枯草芽孢杆菌AS1.398的全长中性蛋白酶基因在毕赤酵母中获得了高效表达,表达产物分泌至培养基中,分子量约为43kD.经甲醇诱导培养后,发酵液中的中性蛋白酶活力达20000 U/mL.
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