【摘 要】
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目的：原核表达并纯化小鼠PD-1膜外区（以下简称mPD-1）蛋白,制备其多克隆抗体.方法：原核表达质粒pGEX-4T-1/mPD-1转化大肠杆菌E.coli BL21（DE3）,IPTG诱导重组蛋白的表达.对表达产物进
【机 构】
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三峡大学分子生物学研究所,三峡大学医学院,三峡大学化学与生命科学院
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目的：原核表达并纯化小鼠PD-1膜外区（以下简称mPD-1）蛋白,制备其多克隆抗体.方法：原核表达质粒pGEX-4T-1/mPD-1转化大肠杆菌E.coli BL21（DE3）,IPTG诱导重组蛋白的表达.对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测.利用蛋白质纯化仪纯化蛋白.使用纯化蛋白免疫日本大耳白兔3次后,分离抗血清,ELISA法测定兔多克隆抗体滴度.用其制备的多克隆抗体通过细胞免疫荧光方法（CIF）和FCM检测高表达PD-1全长基因的L929细胞.结果：诱导表达并纯化了GST-
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