[目的]分析人肺腺癌吉非替尼耐药细胞株H1975(epidermal growth factor receptor,EGFR基因双突变)和人肺腺癌吉非替尼敏感细胞株PC9(EGFR单突变)细胞株微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱的差异。[方法]用Agilent human miRNA芯片分别检测H1975细胞与PC9细胞株的miRNA表达谱,Agilent Feature Extraction软件分析并筛选表达差异达5倍以上的miRNA,生物学软件分析表达差异miRNA的可能靶基因。实时定量PCR(qRT-PCR)验证miRNA芯片结果。[结果]与PC9细胞相比,H1975细胞株中22个miRNA表达上调>5倍,24个miRNA表达下调>5倍。qRT-PCR结果验证了芯片的结果(上调的如hsa-miR-489,hsa-miR-210和hsa-miR-21等;下调的如hsa-miR-205,hsa-miR-200c和hsa-miR-155等),同时发现,其中33个异常表达的miRNA有潜在的靶基因,靶基因超过100个的有24个miRNA。[结论]H1975吉非替尼耐药与miRNA谱异常表达有关,miRNA可能通过调控靶基因而参与EGFR-TKI的获得性耐药。