氮酮促进脂质体介导质粒DNA转染兔角膜内皮细胞及毒性的实验研究

来源 :中华眼视光学与视觉科学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lollipop1910
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目的 探讨氮酮(AZONE)促进脂质体介导质粒DNA转染兔角膜内皮细胞的作用及其对细胞活性的影响.方法 采用细胞培养方法,利用绿色荧光蛋白基因做报告基因,配制不同转染液,脂质体联合pEGFP-N1、氮酮联合脂质体及pEGFP-N1、氮酮联合pEGFP-N1、单纯pEGFP-N1、单纯脂质体、单纯氮酮,分别处理兔角膜内皮细胞,荧光显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白的表达.用RT-PCR方法检测EGFPmRNA表达情况.采用MTT法研究不同转染液对细胞活性的影响.结果 单纯氮酮、单纯脂质体及对照组处理的细胞不表达绿色荧光蛋白.氮酮联合脂质体及pEGFP2N1对兔角膜内皮细胞的转染效率为42.6%,脂质体联合pEGFP2N1组的转染效率为22.4%,氮酮联合PEGFP-N1组的转染效率为7.2%,单组质粒组的转染效率为1%.氮酮加脂质体加PEGFP-N1组转染效率高于其他转染组(P<0.01).各组转染液对角膜内皮细胞活性无影响.结论 氮酮可促进脂质体介导质粒DNA转染兔角膜内皮细胞,在有效的转染浓度下对细胞无明显毒性,有望成为促进角膜内皮细胞基因转染的新型试剂。

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