过氧化氢诱导人自然杀伤细胞损伤的特点和主要机制

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ytw2001
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目的:观察过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导人自然杀伤细胞株(NK92MI)损伤的特点及其主要机制。方法:采用不同浓度H2O2(0、1、5、25 mmol/L)诱导NK92MI细胞损伤,显微镜下观察NK92MI细胞的生长状态;试剂盒检测细胞上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)含量;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测NK92MI细胞对人慢性髓原白血病细胞株K562细胞的杀伤能力;RT-PCR法检测细胞JNK1、Bcl2、PD-1、PD-L1等凋亡相关基因的表达;蛋白免疫印迹法检测细胞JNK1、p-JNK1蛋白的表达。结果:与未经刺激组(H2O2 0mmol/L)相比,经H2O2(1mmol/L、5mmol/L、25mmol/L)刺激5小时后,NK92MI细胞细胞存活率显著下降(P<0.01);凋亡细胞数量明显增多,以annexinV+PI+晚期凋亡细胞居多(P<0.01);对K562细胞的杀伤能力明显下降(P<0.01);JNK1、PD-1、PD-L1表达水平明显增多(P<0.01),Bcl2表达水平明显下降(P<0.05)。结论:H2O2体外诱导NK细胞氧化损伤的特点以细胞晚期凋亡为主,其作用机制与激活JNK1信号通路进而引发细胞程序性死亡相关。
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