【摘 要】
：
通过优化犬子宫内膜基质细胞原代及传代培养方法来提高分离培养细胞纯度和效率,以期为犬子宫内膜相关疾病研究建立模型.采用不同浓度胶原蛋白酶消化、二次网筛过滤及差时消化
【机 构】
：
南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095
论文部分内容阅读
通过优化犬子宫内膜基质细胞原代及传代培养方法来提高分离培养细胞纯度和效率,以期为犬子宫内膜相关疾病研究建立模型.采用不同浓度胶原蛋白酶消化、二次网筛过滤及差时消化法,选择细胞消化最适酶浓度,改进纯化方法,观察犬子宫内膜基质细胞的形态学和生长特性,通过免疫荧光染色鉴定分离的细胞并作图像分析,MTT法检测不同时间点的细胞活率.结果:0.5％胶原酶Ⅰ消化1 h,经400目筛网过滤可.获得大量活力较好的犬子宫内膜基质细胞,且处于发情期的子宫样本分离获得的基质细胞活力更好;细胞呈长梭形或多角形,平行或涡旋状生长,原代细胞培养2～3d基本铺满培养瓶瓶底,可进行有限的传代培养,传代细胞生长迅速并维持基本的形态不变,P9代之前细胞增殖旺盛,冷冻前后均有较高的存活率;免疫荧光法鉴定表明,所获细胞波形蛋白抗体染色阳性,角蛋白抗体染色阴性,证明确为子宫内膜基质细胞,纯度可达95％.本试验为研究犬子宫内膜相关疾病提供了理想的细胞模型.
其他文献
通过对沼液稳定体系的特征性判别以及处理条件正交试验的筛选,实现了既提高过膜通量,又保证了较高营养物保留率的目的.得出结论:1)沼液不是典型单一的胶体或乳状液体系,仅调
为了研究高精料全混合日粮中添加碳酸氢钠对湖羊生长性能、瘤胃发酵参数和细菌菌群的影响,选取体重相近、体况良好的3月龄湖羊16头,随机分为2组,每组8头,对照组饲喂基础日粮,
试验旨在研究3～4月龄中国荷斯坦犊牛的适宜饲粮蛋白水平.选取24头65日龄犊牛随机分为3组,分别饲喂19％、21％和23％3种蛋白水平饲粮,分析饲粮蛋白水平对犊牛生长性能、血液生化指标
旨在探究孕酮受体(progesterone receptor,PGR)基因对湖羊卵泡颗粒细胞体外增殖与凋亡的影响.利用RT-PCR技术扩增和克隆获得PGR基因编码序列(CDS),通过生物信息学软件对其氨
试验旨通过在湖羊全混合颗粒料中添加凹凸棒石抗菌材料,探究其对湖羊生长性能、屠宰性能和肉品质的影响.选取48只平均体重(15～20) kg、日龄(60～70日龄)的健康湖羊,公母各半,随
旨在研究河北省规模化羊场冬季羊舍外围护内表面温度的分布规律.选择规模化羊场的6栋羊舍,采用定点定时的检测方法,分别于早、午、晚对各舍外围护内表面(屋顶2个坡、墙4个侧
高氨氮含量是猪场污水达标处理的一大难点,传统生物脱氮工艺是在不同的工艺条件下分别进行硝化或反硝化作用,设施成本高且占地面积大,因此并不适合应用于猪场污水的处理.异养
以肉仔鸡为模型,通过在日粮中添加高剂量竹叶提取物(BLE),研究其对肉鸡生长性能、血常规、血清生化指标和组织病理学的影响,探讨BLE作为肉鸡饲料添加剂使用的安全性.选择体重
南方水网区作为我国重要的水源地,在暴发非洲猪瘟前(2012-2018年),约14.75％的国土面积承载全国50％左右的生猪供应.在全国25.66万户的规模化猪场中,南方水网区占59.38％,且以大规
为了研究微生物菌剂对粪便恶臭组分及微生物菌群的影响,选取猪粪和玉米秸秆作为堆肥原料进行28 d的堆肥试验.试验分为5组,A、B和C组分别用玉米秸秆调节堆体水分为40％、50％和60％,