【摘 要】
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目的利用大肠杆菌表达系统表达并纯化肠道病毒71型（EV71）VP2蛋白,并对重组蛋白功能进行初步鉴定。方法 PCR扩增EV71 VP2基因,在测序正确的基础上,将其插入表达载体形成pET32a（＋）/V
【机 构】
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广州医学院附属广州市妇女儿童医疗中心实验室
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目的利用大肠杆菌表达系统表达并纯化肠道病毒71型（EV71）VP2蛋白,并对重组蛋白功能进行初步鉴定。方法 PCR扩增EV71 VP2基因,在测序正确的基础上,将其插入表达载体形成pET32a（＋）/VP2,转化BL21（DE3）,IPTG诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）初步分析蛋白表达产物,利用Ni＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,经Western blot初步验证其抗原性。结果成功构建pET32a（＋）/VP2重组质粒,经大肠杆菌表达,纯化获得相对分子质量约为48000的
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