【摘 要】
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目的 探究外泌体源性miR?939调控ADCY6在缺氧诱导的心肌细胞损伤中的作用机制.方法 收集急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清,从血清以及正常心肌细胞中分离外泌体(exosome,exo),二氯化钴(CoCl2)处理H9C2细胞建立缺氧心肌细胞模型.将正常心肌细胞exo与H9C2细胞共培养并检测miR?939的表达.使用MTT、Transwell、流式细胞术检测细胞活力、迁移、凋亡.双荧光素酶报告实验验证miR?939与ADCY6的靶向调控关系.结果
【机 构】
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海南西部中心医院急诊科,海南儋州571700;海南西部中心医院重症医学科,海南儋州571700
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目的 探究外泌体源性miR?939调控ADCY6在缺氧诱导的心肌细胞损伤中的作用机制.方法 收集急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清,从血清以及正常心肌细胞中分离外泌体(exosome,exo),二氯化钴(CoCl2)处理H9C2细胞建立缺氧心肌细胞模型.将正常心肌细胞exo与H9C2细胞共培养并检测miR?939的表达.使用MTT、Transwell、流式细胞术检测细胞活力、迁移、凋亡.双荧光素酶报告实验验证miR?939与ADCY6的靶向调控关系.结果 AMI患者血清、血清外泌体以及缺氧处理的心肌细胞中miR?939表达降低.正常心肌细胞exo能促进缺氧处理的H9C2细胞的增殖、迁移,并抑制心肌细胞凋亡(均P<0.05).在exo中敲减miR?939能部分抵消exo的保护作用.ADCY6被证实是miR?939的靶基因,exo能够促进心肌细胞的增殖、迁移,抑制细胞凋亡,且联合miR?939效果更显著(P<0.05).exo?miR?939的作用可被ADCY6部分抵消(均P<0.05).结论 正常心肌细胞exo通过将miR?939传递给缺氧诱导的心肌细胞来抑制ADCY6的表达,从而减轻心肌细胞损伤,为AMI的诊断和治疗提供了新的分子靶点.
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