【摘 要】
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目的 探讨滑胎安胎协定方促进滋养细胞迁移侵袭治疗复发性流产(RSA)的作用机制。方法 体外培养蜕膜巨噬细胞(DM)并分为中药干预组(加入滑胎安胎协定方含药血清)、IL-4诱导组和空白对照组;采用流式细胞术检测DM分型,ELISA法检测DM中粒细胞集落因子(G-CSF)含量。共培养DM与滋养细胞HTR-8/SVneo细胞,分为DM组、DM+中药组、G-CSF组和空白对照组;采用细胞计数试剂盒-8法检
【基金项目】
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浙江省中医药科技计划青年人才基金项目(2022ZQ021); 国家自然科学基金青年科学基金项目(81801475); 浙江省中医药科学计划项目(2022ZA111);
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目的 探讨滑胎安胎协定方促进滋养细胞迁移侵袭治疗复发性流产(RSA)的作用机制。方法 体外培养蜕膜巨噬细胞(DM)并分为中药干预组(加入滑胎安胎协定方含药血清)、IL-4诱导组和空白对照组;采用流式细胞术检测DM分型,ELISA法检测DM中粒细胞集落因子(G-CSF)含量。共培养DM与滋养细胞HTR-8/SVneo细胞,分为DM组、DM+中药组、G-CSF组和空白对照组;采用细胞计数试剂盒-8法检测细胞存活率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)和上皮间质转化(EMT)相关因子蛋白表达水平。结果 DM实验显示,与空白对照组比较,中药干预组、IL-4诱导组DM数量均明显减少(均P<0.05),M2型DM数量均明显增加(均P<0.05),而M1型DM数量比较差异均无统计学意义(均P>0.05);DM中G-CSF含量均明显升高(均P<0.05)。滋养细胞实验显示,与空白对照组比较,DM组、DM+中药组、G-CSF组滋养细胞存活率、迁移率均明显升高(均P<0.05),滋养细胞侵袭数量均明显增多(均P<0.05);DM组、DM+中药组、G-CSF组滋养细胞p-AKT/AKT、p-ERK1/2/ERK1/2、波形蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05),DM+中药组、G-CSF组上皮细胞钙黏蛋白表达水平均明显降低(均P<0.05)。结论滑胎安胎协定方可通过促进DM分泌G-CSF来激活PI3K/AKT/ERK信号通路和EMT进程,进而调控滋养细胞增殖、迁移和侵袭,从而防止RSA的发生。
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