稳定表达淋巴细胞趋化因子的大鼠系膜细胞载体的构建

来源 :复旦学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：penghong97

【摘要】

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目的探讨以肾小球系膜细胞作为高表达大鼠淋巴细胞趋化因子(Ltn)的载体的可行性,从而为深入研究淋巴细胞趋化因子的作用和体内活性创造条件.方法采用RT-PCR法获得大鼠的Ltn的

【作者】

：

朱春芳徐荣左欧周罗

【机构】

：

复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系

【出处】

：

复旦学报(医学版)

【发表日期】

：

2003年6期

【关键词】

：

淋巴细胞趋化因子大鼠载体肾小球系膜细胞基因转染肾小球疾病 CloningDiseasesDNAGenesProteinsRNA

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目的探讨以肾小球系膜细胞作为高表达大鼠淋巴细胞趋化因子(Ltn)的载体的可行性,从而为深入研究淋巴细胞趋化因子的作用和体内活性创造条件.方法采用RT-PCR法获得大鼠的Ltn的编码区全长的cDNA序列;应用基因重组技术和限制性内切酶酶切法构建并鉴定pcDNA 3.1/Ltn真核表达载体;用LipofectAMINE PLUS脂质体转染法将构建的质粒及空质粒瞬时转染于SKOV3细胞;用RT-PCR和ELISA法检测LtnmRNA及蛋白质水平的表达,进而用pcDNA 3.1/Lac Z和pcDNA 3.1/L

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