【摘 要】
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目的 考察五味子木脂素缓解血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化应激损伤,并探究其内在机制.方法
【机 构】
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嘉兴学院附属第二医院,浙江嘉兴314000
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目的 考察五味子木脂素缓解血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化应激损伤,并探究其内在机制.方法 HUVEC分别于一定浓度梯度的五味子乙素(schisandrinB,Sch B)、五味子丙素(schisandrinC,Sch C)共孵育24h,利用CCK8确定药物作用浓度;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化情况;DCFH-DA和DHE探针检测胞内活性氧表达情况;采用RT-qPCR检测Bax、Bcl-2 mRNA水平,抗氧化蛋白核因子E2相关因子(Nrf-2)、血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶(NQO-1)的mRNA表达情况;采用Western blotting检测Bax、Bcl-2、Nrf-2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap-1)的表达情况;利用特异性的siRNA构建低表达Nrf-2的HUVEC,探究五味子木脂素是否靶向Nrf-2缓解Ang Ⅱ诱导氧化应激损伤.结果 Sch B(50 μmol·L-1)和Sch C(26 μmol·L-1)作用于AngⅡ诱导的HUVEC损伤模型中,发现Sch B、Sch C可通过调控抗氧化轴Nrf-2/Keap-1,抑制细胞凋亡(P＜0.01或P＜0.001)和ROS水平(P＜0.05),促进HO-1 (P＜0.05)、NQO-1 (P＜0.05)等抗氧化酶的表达,并有效缓解H2O2诱导的氧化应激损伤.在特异性沉默Nrf-2的HUVEC中,发现Sch B、Sch C可靶向Nrf-2激活下游抗氧化酶(NQO-1、HO-1)的表达,缓解AngⅡ诱导的氧化应激损伤.结论 Sch B、Sch C可通过调控Nrf-2/Keap-1抗氧化通路缓解AngⅡ诱导的HUVEC氧化应激损伤.
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