【摘 要】
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目的:探讨Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)在蛋白酶体抑制剂MG132诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:根据对蛋白酶体抑制剂敏感程度高低,选取2种人甲状腺未分化癌细胞系FRO和AR
【机 构】
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右江民族医学院组织胚胎学教研室,中国医科大学附属第一医院内分泌科,中国医科大学附属第一医院老年病科,
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目的:探讨Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)在蛋白酶体抑制剂MG132诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:根据对蛋白酶体抑制剂敏感程度高低,选取2种人甲状腺未分化癌细胞系FRO和ARO,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组、Pancaspase抑制剂Z-VAD-FMK处理组及MG132+Z-VAD-FMK联合组,按不同时段处理细胞;利用实时定量RT-PCR法检测各组细胞BAG3 mRNA表达及MG132诱导其表达时效性,蛋白质印迹法检测各组细胞BAG3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:与空白对照组相比,在MG132诱导作用下,2种细胞中BAG3 mRNA表达呈相似程度的增加,具有浓度依赖效应(ARO:F=278.93,P=0.000;FRO:F=410.56,P=0.000),并随作用时间呈现时效性(ARO:F=198.67,P=0.000;FRO:F=174.43,P=0.000);在ARO细胞中,BAG3蛋白表达也呈剂量依赖诱导效应,但各浓度组间细胞凋亡率差异无统计学意义,P>0.05;而在FRO细胞中,随MG132浓度增加,发现大量40×103BAG3剪切片断,其细胞凋亡率亦随之增加,呈剂量依赖效应,在MG132+Z-VAD-FMK联合组中BAG3蛋白显著增加,40×103BAG3剪切片断消失。结论:蛋白酶体抑制剂MG132可诱导上调2种甲状腺癌细胞中BAG3基因表达,在蛋白酶体抑制剂敏感细胞中,随着细胞凋亡增加出现BAG3蛋白的剪切,这一效应可能依赖Caspase介导完成。
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