高效建立129S1/SvImJ 小鼠胚胎干细胞方法的探讨

来源 :浙江大学学报（理学版） | 被引量 : 0次 | 上传用户：zbtoy

【摘要】

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选取超排后129S1/SvImJ品系小鼠的优质囊胚,使用辐照后冻存复苏的小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,对比高浓度酶短时间消化法和低浓度酶长时间消化法,以0.25%胰酶-0.04%EDTA高

【作者】

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姜祖韵吴蓉蓉袁毅君陈良标赵小立陆永良姚行戴利成

【机构】

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浙江大学,生命科学学院,浙江,杭州,310012天水师范学院,生命科学与化学学院,甘肃,天水,741000;中国科学院,遗传与发育生物学研究所,北京,100101;湖州市中心医院,浙江湖州,31300

【出处】

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浙江大学学报（理学版）

【发表日期】

：

2005年5期

【关键词】

：

129S1/SvImJ小鼠囊胚饲养层消化方法胚胎干细胞

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选取超排后129S1/SvImJ品系小鼠的优质囊胚,使用辐照后冻存复苏的小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,对比高浓度酶短时间消化法和低浓度酶长时间消化法,以0.25%胰酶-0.04%EDTA高浓度酶短时间消化法高效建立了4株小鼠胚胎干细胞系,建系率为36.31%.碱性磷酸酶,核型分析,体外分化和体内分化能力以及小鼠胚胎干细胞表面特异性分子标志0ct-4和Nanog的检测等表明,4个ES细胞系均为典型的小鼠胚胎干细胞系.所建立的ES细胞系为大规模培养ES细胞,进行后续的实验建立了理想的材料平台.

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