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报道了以对β－硫酸酯己砜基苯胺（ＳＥＳＡ）为活化剂制备疏水作用层析剂方法及其柱层析纯化脂肪酶的工艺条件。实验结果表明：活化剂对－β－硫酸酯己砜基苯胺（ＳＥＳＡ）最适用量为１．０ｇ／ｇ湿纸纤维素。苯胺：丙酮比为１：４。以０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（ｐＨ８．０）＝１ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ为淋洗剂，以０．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（ｐＨ８．０）＋８％吐温８０为洗脱剂纯化脂肪酶具有较好的分辨率，酶活回收率６４．