视网膜色素上皮细胞中诱导型一氧化氮合酶、精氨酸代谢相关酶的表达及一氧化氮对细胞紧密连接的影响

来源 :中华眼底病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pigho
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目的 研究在免疫活化的视网膜色素上皮(RPE)细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)被诱导、产生NO时,其底物精氨酸的来源;产生的NO对RPE细胞紧密连接的影响.方法用干扰素γ(IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)刺激大鼠视网膜色素上皮细胞系(RPE-J)细胞,Northernblotting、Westernblotting方法研究RPE-J细胞内精氨酸再生系瓜氨酸NO循环的相关酶的表达及地塞米松和环磷酸腺苷(cAMP)对iNOS表达的影响.并通过免疫细胞化学和Westernblotting方法,研究产生的NO对RPE-J细胞紧密连接功能的影响.结果活化的RPE-J细胞中,iNOS和精氨酸的再生系瓜氨酸-NO循环相关酶精氨酸琥珀酸合成酶(AS)在mRNA和蛋白质水平同时被诱导,精氨酸琥珀酸裂解酶(AL)没有被诱导,同时产生NO,cAMP可以增加NO的产量.NO不仅以精氨酸为底物产生,而且也可由瓜氨酸产生.产生的NO破坏RPE-J细胞的紧密连接功能,与紧密连接相关蛋白ZO-1的合成量减少.结论在活化的RPE-J细胞中产生NO时,由瓜氨酸-NO循环再生的精氨酸是RPE-J细胞中产生NO的底物精氨酸的主要来源;NO对RPE-J细胞的紧密连接起破坏作用。

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