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将不含任何启动子的E.coli LacZ基因,插入火鸡疱疹平素FC-126株胸苷激酶编码区末尾的NheⅠ位点,构建成转移载体质粒pTKLacZ。用此质粒和HVT感染的细胞基因组总DNA共感染鸡胚成纤维细胞,在X-gal存在下,通过蓝斑筛选,分离到重组体HVT。rHVT与野生型HVT-FC-126株在CEF中的生长特性完全相似,且在连续传代过程中能稳定表达LacZ基因。