目的:考察柴胡中主要药理活性成分柴胡皂苷d对于人正常肝细胞L-02增值的影响,探究柴胡皂苷d的体外肝毒性及其作用机制,为柴胡的临床应用提供理论依据。方法:运用MTT实验、观察细胞形态学变化,考察柴胡皂苷d对于L-02细胞的毒性影响;通过Annexin V/PI双染测定,探讨柴胡皂苷d是否诱导L-02细胞凋亡;检测给药后细胞上清中的SOD、MDA、LDH等生化指标的变化,来进一步探究柴胡皂苷d肝毒性产生的作用机制。结果:不同浓度的柴胡皂苷d对于细胞毒性呈现剂量相关性,与作用时间无关。作用24h和48h,柴胡皂苷d对人肝细胞L-02的半数抑制浓度(IC50)分别为2.26μg/ml和1.79μg/ml。Annexin V/PI双染未检测到早期凋亡细胞。细胞培养液上清检测结果表明,除了柴胡皂苷d 7.81μg/ml作用48h使细胞损伤严重外,其余浓度组均检测到SOD活性降低、MDA和LDH含量升高。结论:柴胡皂苷d通过氧化损伤机制,降低细胞SOD活性,破坏细胞膜,使细胞发生损伤而发挥毒性,而非通过诱导凋亡产生肝细胞毒性。