【摘 要】
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目的探讨氧化应激时人肺上皮细胞(A549)中NALP3炎性复合体、细胞外调节蛋白激酶(ERK)的表达变化,阿魏酸钠(SF)的干预作用及其可能的机制。方法培养A549细胞,分为空白对照组,H
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目的探讨氧化应激时人肺上皮细胞(A549)中NALP3炎性复合体、细胞外调节蛋白激酶(ERK)的表达变化,阿魏酸钠(SF)的干预作用及其可能的机制。方法培养A549细胞,分为空白对照组,H2O2刺激组,阿魏酸钠组,caspase-1抑制剂(Z-VAD)组,ERK阻断剂(PD98059)组,阿魏酸钠+H2O2组。其中H2O2刺激组用H2O2 200μmol/L培养细胞2h,阿魏酸钠组用阿魏酸钠400μg/mL处理细胞30 min,Z-VAD组、PD98059组、阿魏酸钠+H2O2组分别用Z-VAD 20μmol/L、PD98059 50μmol/L、阿魏酸钠400μg/mL预处理A549细胞30min后加入H2O2200μmol/L培养2h,采用实时荧光定量PCR检测各组A549中caspase-1、NALP3mRNA的表达,Western blot检测caspase-1、NALP3、磷酸化ERK(p-ERK)、ERK蛋白含量;ELISA法检测各组A549上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果与空白对照组比较,H2O2可使A549细胞caspase-1、NALP3mRNA及caspase-1、NALP3、p-ERK/ERK蛋白水平表达增强,IL-1β分泌增加(P均<0.05),而阿魏酸钠组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。与H2O2刺激组比较,Z-VAD组、PD98059组和阿魏酸钠+H2O2组caspase-1、NALP3mRNA及蛋白表达降低,p-ERK/ERK蛋白表达降低,IL-1β分泌下降(P均<0.05),Z-VAD组或PD98059组与阿魏酸钠+H2O2组间上述作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿魏酸钠可能通过抑制ERK活化,减少caspase-1、NALP3及IL-1β的表达,从而减轻氧化应激导致的炎症级联反应。
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