【摘 要】
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以广西火桐DNA为模板,利用正交试验分别对ISSR-PCR反应的MgCl2浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板DNA浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最佳退火温度和循环次数,最终确
【机 构】
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中国科学院广西植物研究所,广西师范大学生命科学学院
【基金项目】
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广西植物研究所基本业务费支持项目（桂植业12009）, 广西科技创新能力与条件建设项目（桂科能11217028）
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以广西火桐DNA为模板,利用正交试验分别对ISSR-PCR反应的MgCl2浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板DNA浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最佳退火温度和循环次数,最终确定广西火桐最佳反应体系及扩增条件。25μL体系中1×PCR buffer,2.5 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTPs,0.06 U/μL TaqDNA聚合酶,3 ng/μL DNA模板,0.2μmol/L引物;最佳扩增程序为：94℃预变性5 min;94℃变性45 s,52℃退
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