二氧化碳对小鼠神经母细胞瘤细胞跨间皮细胞迁移影响的实验研究

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shanghairenxuchenhui
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目的 本实验研究不同气体条件对神经母细胞瘤细胞跨间皮细胞迁移的影响,探讨CO2气腹对腹腔肿瘤细胞迁移影响的潜在机制.方法 经0.125%胰酶预处理后,通过腹腔灌洗分离培养C57/BL6小鼠腹膜间皮细胞.间皮细胞纯化通过细胞形态学及免疫组化方法(小鼠间皮细胞角蛋白特异性抗体AE1/AE3)鉴定.MTT实验确定细胞活力.使用Transwell系统培养连续间皮细胞层,分别暴露于100%CO2及5%CO2 2 h,经荧光染色后的小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2a)加入至Transwell系统上室,细胞迁移数目经多功能检测仪进行测定.结果 MTT实验提示,间皮细胞于5%CO2及100%CO2暴露后4 h、6 h、10 h及24 h后两组细胞活力分别为0.82±0.28比0.62±0.22、0.87士0.24比0.62±0.28、0.88±0.69比0.69±0.81及1.05±0.86比0.97±0.25,差别无统计学意义.迁移实验表明,间皮细胞于100%CO2中暴露后,细胞屏障功能下降,Neuro2a迁移数目增加258.56±71.08比77.05±27.89(P<0.05).结论 100%CO2利于神经母细胞瘤细胞跨间皮细胞迁移.因此,小鼠模型中发现的CO2气腹后神经母细胞瘤转移增加可能与间皮细胞屏障削弱有关。

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