黑麦1R染色体的显微分离,体外扩增及扩增产物的鉴定

来源 :木本植物研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dandu10
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借助Leitz显微操作器,在国产倒置显微镜下(400×)用玻璃针对处于有丝分裂中期的黑麦根尖细胞中的1R染色体成功地进行了分离。分离出来的1R染色体转入0.5ml的Eppendorf管中,用蛋白酶K处理,反DNA释放出来;经Sau3A酶切,再与人工合成的Sau3A连接头连接;以连接头的一条链的核苷酸顺序片段为引物对DNA酶切片段进行了PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度大约为300-100
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