快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及相关基因表达的研究

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目的:研究及探讨快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及其相关基因表达。方法:不同剂量X射线(0、2、4、6、8、10Gy)及具有同等放射生物学效应的相当于X射线1/3剂量的不同剂量快中子(0、0.67、1.34、2.01、2.68、3.34Gy)照射细胞,于37℃孵育6小时24小时48小时72小时后,进行Hoechest 33 342荧光染色,观察细胞凋亡形态并计数凋亡指数AI(凋亡细胞的百分数);用电子显微镜观察凋亡细胞特有的形态学特征;此外,我们分别对不同剂量(0、2、4、6、8、10Gy) X射线及快中子(0、0.67、1.34、2.01、2.68、3.34Gy)照射后24小时的细胞用免疫组化方法进行基因表达(p53及bcl-2)的检测。结果:不同剂量X射线和快中子照射的细胞凋亡指数随着照射剂量和受照时间的延长而逐渐增加,在同一时间点,快中子诱导的细胞凋亡水平明显高于X射线;不同剂量X射线照射后的细胞,较阳性对照组,p53基因表达下调明显,bcl-2基因表达下调不明显;不同剂量快中子照射后的细胞,p53及bcl-2基因表达下调均不明显。结论:高能X射线和快中子诱导人直肠癌细胞的凋亡具有明确的时间-剂量相关性,随着受照后时间的延长和剂量的逐渐增大,凋亡指数渐趋升高,无明显变缓之势;快中子照射人直肠癌细胞,与X射 Objective: To study and explore the apoptosis of human rectal cancer cells induced by fast neutrons and X-rays and their related gene expression. Methods: Different doses of X-rays (0, 2, 4, 6, 8, 10 Gy) and equivalent radiobiological effects were equivalent to X-ray 1/3 doses of different doses of fast neutrons (0, 0.67, 1. 34, 2.01, 2.68, 3.34 Gy) irradiated cells, incubated at 37 °C for 6 hours, 24 hours, 48 ​​hours, 72 hours, followed by Hoechst 33 342 fluorescence staining to observe the apoptotic morphology and count apoptosis. Index AI (percentage of apoptotic cells); electron microscopic observation of the characteristic morphological features of apoptotic cells; in addition, we used different doses (0, 2, 4, 6, 8, 10 Gy) of X-rays and fast neutrons ( Cells at 0, 0.67, 1.34, 2.01, 2.68, 3.34 Gy) 24 h after irradiation were tested for gene expression (p53 and bcl-2) by immunohistochemistry. RESULTS: Apoptosis index of different doses of X-rays and fast neutrons increased gradually with the irradiation dose and exposure time. At the same time point, the apoptosis induced by fast neutrons was significantly higher than that of X-rays. Different doses of X-irradiated cells, compared with the positive control group, p53 gene expression was down-regulated, bcl-2 gene expression was down-regulated; cells after different doses of fast neutron irradiation, p53 and bcl-2 gene expression were not down-regulated obvious. Conclusion: The apoptosis of human rectal cancer cells induced by high-energy X-rays and fast neutrons has a definite time-dose correlation. With the prolongation of exposure time and the gradual increase of dose, the apoptotic index gradually increases. Significantly slowed down; fast neutrons illuminate human rectal cancer cells, and X-rays
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