【摘 要】
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目的构建人食管癌相关基因4（ECRG4）原核表达载体，表达纯化ECRG4重组蛋白，验证ECRG4重组蛋白的生物学功能。方法利用DNA重组技术构建ECRG4重组蛋白原核表达载体。转化大肠杆菌，表达纯化ECRG4重组蛋白，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析ECRG4重组蛋白纯度。用磷酸盐缓冲液（PBS）和10 μg/ml ECRG4重组蛋白分别处理食管癌EC-18细胞48 h，流
【机 构】
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目的构建人食管癌相关基因4（ECRG4）原核表达载体，表达纯化ECRG4重组蛋白，验证ECRG4重组蛋白的生物学功能。
方法利用DNA重组技术构建ECRG4重组蛋白原核表达载体。转化大肠杆菌，表达纯化ECRG4重组蛋白，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析ECRG4重组蛋白纯度。用磷酸盐缓冲液（PBS）和10 μg/ml ECRG4重组蛋白分别处理食管癌EC-18细胞48 h，流式细胞术检测肿瘤细胞周期的变化。
结果SDS-PAGE分析显示获得了高纯度的ECRG4重组蛋白，成功构建了ECRG4蛋白原核表达载体。PBS对照组与ECRG4重组蛋白组G1期细胞比例分别为（60.4±2.1）%、（71.6±1.8）%（t=25.695，P=0.002），S期细胞比例分别为（24.6±1.4）%、（16.5±1.0）%（t=36.905，P=0.001），G2/M期细胞比例分别为（15.0±1.1）%、（11.9±0.8）%（t=6.471，P=0.023），提示ECRG4重组蛋白能诱导EC-18细胞G1期阻滞。
结论成功构建ECRG4原核表达载体，ECRG4重组蛋白在食管癌中具有活性生物学功能。
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