【摘 要】
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目的评价蛋白激酶Cα(PKCα)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用及其与线粒体融合蛋白-1(Mfn1)的关系。方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以1×104个/ml密度接种于96孔板中。采用随机数字表法分为5组(n＝15)：对照组(C组)、内毒素攻击模型组(E组)、PKCα抑制剂Go6976组(G组)、PKCα激动剂PMA组(P组)和二甲基
【机 构】
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目的评价蛋白激酶Cα(PKCα)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用及其与线粒体融合蛋白-1(Mfn1)的关系。
方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以1×104个/ml密度接种于96孔板中。采用随机数字表法分为5组(n＝15)：对照组(C组)、内毒素攻击模型组(E组)、PKCα抑制剂Go6976组(G组)、PKCα激动剂PMA组(P组)和二甲基亚砜组(D组)。采用给予10 μg/ml LPS刺激NR8383细胞的方法制备肺泡巨噬细胞内毒素攻击模型。G组、P组和D组于LPS刺激前30 min分别给予5 μmol/L Go6976、100 nmol/L PMA、0.1%二甲基亚砜预处理30 min，再给予10 μg/ml LPS，各组均孵育24 h后收集细胞，检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性，采用Western blot法及q-PCR法检测PKCα、HO-1和Mfn1的表达。
结果与C组比较，E组、G组、P组和D组MDA和ROS含量升高，SOD活性降低，PKCα、HO-1及其mRNA表达上调，Mfn1及其mRNA表达下调(P<0.05)；与E组比较，G组MDA和ROS含量升高，SOD活性降低，PKCα、HO-1、Mfn1及其mRNA表达下调，P组MDA和ROS含量降低，SOD活性升高，PKCα、HO-1、Mfn1及其mRNA表达上调(P<0.05)，D组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。
结论PKCα/HO-1信号通路激活后促进Mfn1表达是内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤时的内源性保护机制。
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