【摘 要】
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目的:筛选和鉴定β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株并对酶基因进行克隆和序列分析.方法:利用透明圈法从食堂锅炉排水口污泥中分离筛选菌株,并采用形态和生理生化特征鉴定菌株.通过
【机 构】
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浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养学重点实验室
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目的:筛选和鉴定β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株并对酶基因进行克隆和序列分析.方法:利用透明圈法从食堂锅炉排水口污泥中分离筛选菌株,并采用形态和生理生化特征鉴定菌株.通过PCR方法扩增酶基因,将其克隆于T-载体,用Sanger双脱氧链终止法测定序列.结果:分离筛选的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株呈长杆状、革兰氏染色可变、兼性厌氧、产芽孢(次端生、孢囊膨大).生理生化试验结果表明:该菌株与浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)最为相近,命名为Bacillus sp A3.PCR扩增获得的酶基因全长734bp,其中开放阅读框架为717bp,编码238个氨基酸.经Blast分析,该序列与多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)和浸麻类芽孢杆菌(B.macerans)相似性较高,分别为98%和82%.结论:成功分离了β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株Bacillus sp A3,酶基因序列与多粘芽孢杆菌和浸麻类芽孢杆菌有较高的同源性.
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